做带荧光标记啊瞬时转染的话,除了在荧光显微镜下看转染效率外,还需要做PCR 和Western验证基因表达吗?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/05/10 13:14:17
做带荧光标记啊瞬时转染的话,除了在荧光显微镜下看转染效率外,还需要做PCR和Western验证基因表达吗?做带荧光标记啊瞬时转染的话,除了在荧光显微镜下看转染效率外,还需要做PCR和Western验证

做带荧光标记啊瞬时转染的话,除了在荧光显微镜下看转染效率外,还需要做PCR 和Western验证基因表达吗?
做带荧光标记啊瞬时转染的话,除了在荧光显微镜下看转染效率外,还需要做PCR 和Western验证基因表达吗?

做带荧光标记啊瞬时转染的话,除了在荧光显微镜下看转染效率外,还需要做PCR 和Western验证基因表达吗?
什么荧光?GFP还是什么.
如果是GFP就不用了,因为是融合蛋白,只要有荧光就说明你的蛋白也表达了.
还要看你的目的是什么,蛋白的细胞定位就不用做WB.
表达载体就必须做.

一般要做个WB,显微镜下看到的只是是否转进去了,wb可以看出该蛋白是否表达。最好参考pubmed上的相关文献。

镜检荧光只是定性的看到你的蛋白有表达并能定位,如果要定量的话最好做realtime PCR 并作western blot 验证,这样才能知道你的蛋白比较精确的表达量。

我做类似的实验的时候,是做PCR和western验证的,一般都需要验证的。