ELISA反应中,样品液、抗体、酶标二抗能不能一起加进去啊?检测步骤是先加样品和抗体,反应过后洗板,再加入酶标二抗,再洗板.不能3个一起加进去反应,然后再洗板吗?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/05/10 00:12:10
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ELISA反应中,样品液、抗体、酶标二抗能不能一起加进去啊?
检测步骤是先加样品和抗体,反应过后洗板,再加入酶标二抗,再洗板.不能3个一起加进去反应,然后再洗板吗?

ELISA反应中,样品液、抗体、酶标二抗能不能一起加进去啊?检测步骤是先加样品和抗体,反应过后洗板,再加入酶标二抗,再洗板.不能3个一起加进去反应,然后再洗板吗?
由于你问题中有提到酶标二抗,我认为应该是有两种可能,(1)产品为双抗体夹心法检测抗原,这种情况下有些产品可以比如HBSAG一步法,加入样品50ul后立即加入50ul酶标多抗温育30min洗版加底物显色终止即可.(2)产品为间接法,检测抗体,酶标二抗为抗你检测抗体种源的另一种源抗体,如检测人的IgG,可标记鼠抗人-HRP.这种情况是不能混合的因为二抗会与样本中的所有IgG反应,估计会导致类似HOOK效应的结果.

检测步骤中的洗板是为了清除没有结合的物质,同时洗掉非特异性的结合物,各反应步骤分开可以得到更特异的反应结果, 防止假阳性和假阴性的产生。 所以通常各步骤都是分开的。

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