western blot用的一抗识别的是什么表位的?在跑sds-page 时蛋白质已经变性了,空间表位已经不存在了.而我们知道抗体都是识别空间表位的.T细胞需要抗原递呈才能识别线性表位.小木虫的 大仙 也

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/05/09 23:54:57
westernblot用的一抗识别的是什么表位的?在跑sds-page时蛋白质已经变性了,空间表位已经不存在了.而我们知道抗体都是识别空间表位的.T细胞需要抗原递呈才能识别线性表位.小木虫的大仙也we

western blot用的一抗识别的是什么表位的?在跑sds-page 时蛋白质已经变性了,空间表位已经不存在了.而我们知道抗体都是识别空间表位的.T细胞需要抗原递呈才能识别线性表位.小木虫的 大仙 也
western blot用的一抗识别的是什么表位的?在跑sds-page 时蛋白质已经变性了,空间表位已经不存在了.而我们知道抗体都是识别空间表位的.T细胞需要抗原递呈才能识别线性表位.
小木虫的 大仙 也会上百度的把

western blot用的一抗识别的是什么表位的?在跑sds-page 时蛋白质已经变性了,空间表位已经不存在了.而我们知道抗体都是识别空间表位的.T细胞需要抗原递呈才能识别线性表位.小木虫的 大仙 也
多看看书吧.
虽然我做过多抗,也不是很了解原理.不过你说的什么抗体都是识别空间表位的,那倒未必,因为我看到过是有识别线性表位的.而且我们跑了SDS-PAGE之后切胶免疫家兔,明显都是变性过后的.
而且据我所知,现在有的公司做的抗体都是用某个蛋白N-或者C-端比较保守的几个氨基酸序列,通过合成这几个氨基酸,与BSA还是什么结合(不好意思,本科毕业都3年了,说错不负责啊),不过那个大分子好像是免疫原性比较低,我觉得那几个氨基酸也不可能会有正确的如原来蛋白的空间表位吧.
小木虫我不怎么上.多去丁香园吧.不过我毕业后也再没上过了.我本科毕业的时候倒是经常去中国生命科学论坛,现在好冷清啊.喜欢丁香园,哈哈.

谁说抗体都是识别空间表位的?
SDS-PAGE用的抗体就是识别线性表位的嘛

……
你把这种问题拿到百度上太高看百度的诸位大神了,即使等到有人回答也不知道是猴年马月或者被一大堆不知所谓的胡乱跟帖挤到几百楼去了。
建议你去小木虫,那里有专业经验的人比较多

现在的市面上买的抗体很少是识别空间表位的
一般都是识别蛋白质一段保守的特异的氨基酸序列
这个就足够了
所以SDS-PAGE变性了之后还是能识别的

一抗一般都是识别的氨基酸序列的
制作一抗时,就是把所要的蛋白质进行原核表达,表达完之后可以用柱子或磁珠进行纯化,这种方法一般成本比较高。
还有一种方法就是把原核表达完的菌液收集菌体,超声破碎,然后全部跑电泳(SDS-PAGE),之后用KCl染色(不是考染),将目的大小片段切下,用液氮研碎,加入PBS buffer,公司直接将这种糊状的东西注射给兔子。大多数抗体公司都允许...

全部展开

一抗一般都是识别的氨基酸序列的
制作一抗时,就是把所要的蛋白质进行原核表达,表达完之后可以用柱子或磁珠进行纯化,这种方法一般成本比较高。
还有一种方法就是把原核表达完的菌液收集菌体,超声破碎,然后全部跑电泳(SDS-PAGE),之后用KCl染色(不是考染),将目的大小片段切下,用液氮研碎,加入PBS buffer,公司直接将这种糊状的东西注射给兔子。大多数抗体公司都允许这样做。
可见制作抗体时,抗原就已经变性了。

收起