什么原因会导致overlap PCR拼不出?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/05/03 11:37:09
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什么原因会导致overlap PCR拼不出?

什么原因会导致overlap PCR拼不出?
两个片段的大小不能太大.
中间重叠部分不能太短,至少要有20nt以上.30,40比较好.

试试把退火时间延长一些,看能不能把两条链连上。一般就是照着引物的Tm值做就可以的。 你的设计有没有问题?重叠那段的引物是连接的关键,而这段